cDNA克隆的构建过程
首先是逆转录酶和cDNA第一链的合成。逆转录酶是DNA或者RNA依赖的DNA聚合酶,可以利用DNA或者RNA合成DNA。cDNA的克隆主要是通过寡聚胸腺嘧啶从3’A尾巴开始合成cDNA,但这样得到的cDNA克隆中有10%~15%没有3’端的序列;6到9个核苷酸随机引物也可用于逆转录的反应中,这对于长转录本5’端的扩增很有利,但是这样的方法不能得到全长cDNA;其次是合成cDNA第二链。单链cDNA3’端的发卡结构,便于DNA聚合酶I发挥5’→3’聚合酶活性,合成cDNA的第二链;最后将双链cDNA克隆到质粒和噬菌体载体中进行扩增,最后进行测序,研究转录本的信息以及功能。
复能基因cDNA克隆特点
- 源于高质量的cDNA文库,外源片段插入区为全长转录本
- 保证ORF区序列的准确性
- 所有cDNA克隆的基因全为NCBI标准
- 克隆易于在大肠杆菌保存和扩增基因
- 价格优惠,即购即得
cDNA 克隆载体
| Lafmid BA |
| pAD-GAL4 |
| pAMP1 |
| pAMP10 |
| pBC SK+ |
| pBK-CMV |
| pBluescribe (modified) |
| pBluescript (modified) |
| pBluescript II KS+ |
| pBluescript II SK+ |
| pBluescript KS+ |
| pBluescript SK+ |
| pBluescript SK- |
| pBluescript-FL |
| pBluescriptR |
| pBSRN3 |
| pCDNA3 |
| pcDNA3.1 |
| pcDNA3.1(-) |
| pcDNA3.1Zeo |
| pcDNAI |
| pCDNAII |
| pCI-neo (updated) |
| pCMV-SPORT |
| pCMV-SPORT2 |
| pCMV-SPORT4 |
| pCMV-SPORT6 |
|
| pCR4Blunt-TOPO |
| pCS105 |
| pCS107 |
| pCS108 |
| pCS111 |
| pCS2+ |
| pCS22+ |
| pCS2G |
| pDNR-Dual |
| pDNR-LIB |
| pDNR-NCI |
| pENTR/D-TOPO |
| pENTR201 |
| pENTR221 |
| pENTR223 |
| pENTR223.1 |
| pENTR223.1-Sfi |
| pET-28a |
| pET-28b |
| pExpress-1 |
| pCMV-SPORT6.1 |
| pCMV-SPORT6.ccdb |
| pCR-BluntII-TOPO |
| pCR-XL-TOPO |
| pCR2.1-TOPO |
| pCR3.1 |
| pCR4-TOPO |
|
| pFLC1 |
| pGA1 |
| pGA4 |
| pGA7 |
| pGA14 |
| pGA15 |
| pGA18 |
| pGA19 |
| pGA24 |
| pGH |
| pME18S-FL3 |
| pOTB7 |
| pOTB7-3 |
| pOTB7a |
| pPCR-Script Amp SK(+) |
| pRKW2 |
| pSMART_cDNA |
| pSPORT1 |
| pSPORT2 |
| pT7T3D-PacI |
| pUC19 |
| pUC19-Cam |
| pUC19-Kan |
| pUC19-Sfi |
| pUC57 |
| pYX-Asc |
| pZERO-2 |
| pZL-1 |
|
* 本产品仅供研究、不用于临床诊断